Come valutare le prestazioni di un obiettivo da microscopio
Obiettivi per microscopia ottica
Quante tipologie di obiettivi esistono, come si riconoscono le loro caratteristiche, come sceglierli? La prima distinzione da fare è se sono dedicati per microscopio dritto (Upright), o per microscopio rovesciato (Inverted).
La metodica di osservazione è un’altra differenziazione importante: campo chiaro, contrasto di fase, polarizzazione ecc., definiscono differenti classi di obiettivi. Le indicazioni più importanti che definiscono un obiettivo da microscopio le troviamo scritte sull’obiettivo stesso. Queste informazioni sono forse le uniche che si possono evidenziare analizzando il microscopio nei suoi componenti e che ne definiscono le prestazioni.
Le correzioni delle aberrazioni e risoluzione
Tutti gli obiettivi si dividono in almeno quattro gruppi:
- Acromatici
- Plan Acromatici
- Semi Apocromatici (Ob. Con fluorite)
- Apocromatici
Le differenze principali di queste categorie consistono nella qualità della correzione delle aberrazioni cromatiche, della planarità di campo e del campo visualizzato (Indice di Campo), e per finire della Apertura numerica (AN) che ne definisce il potere di risoluzione.
Tipologia | Cromatica | Planarità | Indice di Campo |
---|---|---|---|
Acromatici | 2 lunghezze d’onda | 18 mm | 18 mm |
Plan Acromatici | 2 lunghezze d’onda | 20/22 mm | 20/22 mm |
Semi Apocromatici | 2 lunghezze d’onda con la 3 maggiormente corretta | 25/26 mm | 25/26 mm |
Apocromatici | 3 lunghezze d’onda | 25/26 mm | 25/26 mm |
Per le spiegazioni sulla correzione cromatica e per Planarità/indice di Campo vedi dispensa Academy n° 5.
Come riconoscere gli obiettivi le applicazioni e caratteristiche: codici colori
Per ogni tipologia di obiettivi esistono differenti campi di applicazione che sono tipiche della metodica d’osservazione (vedi Academy n° 6, 7, 8, 9).
Tipologia | BF | DF | Ph | FL | PO | DIC | RC | WI | LWD | 340 | IR |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Acromatici | X | X | |||||||||
Plan Acromatici | X | X | X | X | X | X | X | X | X | ||
Semi Apocromatici | X | X | X | X | X | X | X | X | X | X | |
Apocromatici | X | X | X | X | X | X |
BF = Bright Field Campo Chiaro
DF = Dark Field Campo Scuro
Ph = Phase Contrast Contrasto di Fase
FL = Fluorescenza
PO = Polarizzazione
DIC = Differential Interference Contrast
RC = Rilief Contrast
WI = Water Immersion per elettrofisiologia
LWD = Long Working Distance culture cellulari
340 = Obiettivi trasparenti all’ultra violetto
IR = Infra Red per elettrofisiologia
Ogni metodo di osservazione ed il suo campo di utilizzo, richiede la selezione più appropriata degli obiettivi dedicati a quello scopo. La scelta di un setup nuovo va fatta sempre con un esperto che possa consigliare le migliori soluzioni.
Ma se ci troviamo ad utilizzare un microscopio già predisposto, come possiamo riconoscere la qualità degli obiettivi ed il loro corretto utilizzo?
Come detto, le informazioni fondamentali e forse le uniche visibili facilmente su un microscopio ottico, sono indicate sull’obiettivo e sono di facile lettura. Vediamo come.
1: Classificazione correzione cromatica
2: Ingrandimento
3: Tipo mezzo immersione
4: Indice di campo Correzione planarità
5: Codice colore per ingrandimento
6: Apertura numerica
7: Spessore copri oggetto
8: Tipo di sistema ottico (infinito)
9: Codice colore mezzo immersione
Un’altra possibilità di identificare il tipo di obiettivo consiste nell’interpretare i colori che sono presenti sugli obiettivi.
Un’altra importante informazione riguarda l’applicazione di osservazione a cui sono dedicati gli obiettivi.
Restando ferme le precedenti indicazioni, alcune specifiche applicazioni sono indicate in modo estremamente facile da riconoscere.
Per gli obiettivi dedicati al contrasto di fase è presente la sigla Ph e spesso le scritte sono di colore verde. Allo stesso modo per gli obiettivi adatti in osservazioni in luce polarizzata oltre la sigla PO le scritte sono di colore rosso. Per le osservazioni in IR o in ultravioletto 340 le indicazioni sono sempre leggibili sull’obiettivo.
Con queste informazioni è possibile quindi riconoscere la tipologia, la qualità e le prestazioni in generale degli obiettivi che stiamo utilizzando.
Oggi le principali aziende di microscopia ottica propongono obiettivi specifici per tutte le applicazioni che vanno dalla didattica fino alle soluzioni molto particolari per la ricerca, come confocali, TIRF e soluzioni per RAMAN e molte altre.
Come sempre Sintak s.r.l. può aiutarvi nella giusta scelta dei componenti in base alle vostre esigenze e definire il miglior setup per il vostro microscopio ottico per qualsiasi applicazione richiesta.
Per questo vi invitiamo a contattarci per approfondire la scelta migliore per voi.
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